RESUMO
Abstract The principle and the techniques applied in DNA extraction play a pivotal role in the obtention of a purified genetic material. The present study investigates the efficiency of eight protocols in the DNA extraction of Hypostomus commersoni, an essential component of South American freshwater ichthyofauna. The quality of samples was assessed through spectrophotometry, gel electrophoresis, and PCR-RAPD markers amplification. The efficiency of DNA extraction was influenced both by the method applied and the target-tissue of choice. Higher concentrations and yield of DNA were obtained from ocular tissue, with a positive spectrum of incubation in lysis buffer for up to 36 hours after sample collection, using fresh tissues and in the presence of a high concentration of Proteinase K (20 mg.ml-1). In these conditions, samples were successfully amplified. To date, there is no record of description for the parameters analyzed in this work, neither the description of RAPD markers for the species H. commersoni.
Resumo Os princípios e as técnicas aplicadas na extração de DNA desempenham um papel crucial na obtenção de material genético purificado. O presente estudo investiga a eficiência de oito protocolos na extração de DNA de Hypostomus commersoni, um importante componente ictiofaunístico de riachos da América do Sul. A qualidade das amostras foi avaliada por espectrofotometria, eletroforese em gel e amplificação por marcadores de PCR-RAPD. A eficiência da extração de DNA foi influenciada tanto pelo método aplicado quanto pelo tecido-alvo de escolha. Maiores concentrações e rendimento de DNA foram obtidos a partir do tecido ocular, com um espectro positivo de incubação em tampão de lise por até 36 horas após a coleta da amostra, utilizando tecidos frescos e na presença de alta concentração de proteinase K (20 mg.ml-1). Nestas condições, as amostras foram amplificadas com sucesso. Até o momento, não há registro de descrição para os parâmetros analisados neste trabalho, nem a descrição de marcadores RAPD para a espécie H. commersoni.
Assuntos
Animais , Peixes-Gato/genética , DNA/genética , Técnica de Amplificação ao Acaso de DNA Polimórfico , GenômicaRESUMO
Abstract The principle and the techniques applied in DNA extraction play a pivotal role in the obtention of a purified genetic material. The present study investigates the efficiency of eight protocols in the DNA extraction of Hypostomus commersoni, an essential component of South American freshwater ichthyofauna. The quality of samples was assessed through spectrophotometry, gel electrophoresis, and PCR-RAPD markers amplification. The efficiency of DNA extraction was influenced both by the method applied and the target-tissue of choice. Higher concentrations and yield of DNA were obtained from ocular tissue, with a positive spectrum of incubation in lysis buffer for up to 36 hours after sample collection, using fresh tissues and in the presence of a high concentration of Proteinase K (20 mg.ml-1). In these conditions, samples were successfully amplified. To date, there is no record of description for the parameters analyzed in this work, neither the description of RAPD markers for the species H. commersoni.
Resumo Os princípios e as técnicas aplicadas na extração de DNA desempenham um papel crucial na obtenção de material genético purificado. O presente estudo investiga a eficiência de oito protocolos na extração de DNA de Hypostomus commersoni, um importante componente ictiofaunístico de riachos da América do Sul. A qualidade das amostras foi avaliada por espectrofotometria, eletroforese em gel e amplificação por marcadores de PCR-RAPD. A eficiência da extração de DNA foi influenciada tanto pelo método aplicado quanto pelo tecido-alvo de escolha. Maiores concentrações e rendimento de DNA foram obtidos a partir do tecido ocular, com um espectro positivo de incubação em tampão de lise por até 36 horas após a coleta da amostra, utilizando tecidos frescos e na presença de alta concentração de proteinase K (20 mg.ml-1). Nestas condições, as amostras foram amplificadas com sucesso. Até o momento, não há registro de descrição para os parâmetros analisados neste trabalho, nem a descrição de marcadores RAPD para a espécie H. commersoni.
RESUMO
Abstract The wildlife of the Brazilian Pampa is threatened by large-scale habitat loss, due in particular to the expansion of soybean cultivation and the conversion of grasslands areas into extensive areas of silviculture. It is essential to study how the mammal fauna copes with the highly fragmented, human-influenced, non-protected landscape. Our study presents the results of a survey of the large- and medium-sized mammals of a typical human-influenced steppic savanna area of the Pampa biome. The survey was conducted exclusively with the use of camera traps over a period of 16 months. The relative frequencies of species in the area were evaluated. We recorded 18 species, some of them locally threatened (Tamandua tetradactyla, Alouatta caraya, Leopardus colocolo, Leopardus geoffroyi, Leopardus wiedii, Puma yagouaroundi, Mazama gouazoubira and Cuniculus paca). Several species were found to thrive in the area; however, many species were considered rare, and undoubtedly new species could be recorded if we continued the sampling. Our results contribute to the knowledge of faunal diversity in the Pampa biome and associated habitats, warn about threats and provide support for conservation measures.
Resumo A fauna do Pampa brasileiro está sendo ameaçada pela grande perda de habitat que vem sofrendo, em especial, devido à expansão do cultivo da soja e da conversão de áreas de pastagens em extensas áreas de silvicultura. É essencial estudar como a fauna de mamíferos lida com a paisagem altamente fragmenta e não protegida, pela influencia humana. Nosso estudo apresenta os resultados de um levantamento dos mamíferos de médio e grande porte em uma área típica do bioma Pampa com influência humana. O levantamento foi realizado exclusivamente com o uso de armadilhas fotográficas ao longo de um período de 16 meses. Foram avaliadas as frequências relativas das espécies na área. Foram registradas 18 espécies, algumas delas ameaçadas localmente (Tamandua tetradactyla, Alouatta caraya, Leopardus colocolo, Leopardus geoffroyi, Leopardus wiedii, Puma yagouaroundi, Mazama gouazoubira e Cuniculus paca). Várias espécies foram encontradas de forma abundante, no entanto, muitas espécies foram consideradas raras, sendo que novas espécies poderiam ser registradas se continuássemos a amostragem. Nossos resultados contribuem para o conhecimento da diversidade de mamíferos do bioma Pampa e habitats associados, alertam sobre ameaças e fornecem suporte para medidas de conservação.